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虾青素对氧化应激小鼠肝原代细胞的保护作用
作者: 张珊珊 [1] 郑鑫 [1] 吴曼 [2] 张晓音 [1] 沈家鲲 [1]
关键词: 虾青素 小鼠肝原代细胞 氧化应激 Keapl蛋白 Nrf2蛋白
摘要:试验旨在研究虾青素对过氧化氢(H2O2)诱导小鼠肝原代细胞产生氧化应激的影响.采用改进的原位二步灌流法提取ICR小鼠肝原代细胞,流式细胞仪检测细胞凋亡率、活细胞率的变化,生物化学法测定细胞中丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)、γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(y-GCS)的活性变化;荧光定量PCR测定CAT、γ-GCS催化亚基(GCLC)、Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keapl)、核因子E2相关因子2(Nrf2) mRNA相对表达量的变化,ELISA法检测细胞中Keap1、Nrf2蛋白的变化.结果表明:虾青素能够降低H2O2诱导小鼠肝原代细胞产生氧化应激的细胞凋亡率、MDA含量、Nrf2和Keap1 mRNA相对表达量(P<0.05),提升活细胞率、CAT和y-GCS活性(P<0.05)、CAT和GCLC的mRNA相对表达量(P<0.05),抑制Nrf2蛋白及Keap1蛋白的表达(P<0.05).虾青素能够促进相关抗氧化酶的活性,抑制Nrf2蛋白及Keap1蛋白表达进而抑制Keap 1-Nrf2-ARE信号通路的激活.
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