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PTEN基因干扰对牛脂肪细胞凋亡的影响
作者: 韩天苍 柳海星 耿春银 戢爽
关键词: PTEN基因 牛脂肪细胞 RNA干扰 细胞凋亡
摘要:实验旨在研究RNA干扰PTEN基因对牛脂肪细胞中p-Akt蛋白及凋亡蛋白Caspase-3表达的影响.将人工合成的靶向PTEN基因的3条干扰质粒Si-952组、Si-1331组、Si-1435组及阴性对照组(只加转染阴性对照质粒)和空白组(只加PBS缓冲液),在脂质体介导下转染牛脂肪细胞,用RT-qPCR方法检测并筛选干扰效率最高的1条SiRNA.Western blot法检测PTEN基因沉默后对p-Akt和Caspase-3表达的影响.结果表明:PTEN-Si-1331组干扰效率最高,转染48 h后抑制率可达85%;牛脂肪细胞转染Si-1331组Caspase-3蛋白表达水平极显著低于阴性对照组和空白组(P<0.01),而p-Akt蛋白表达水平显著高于阴性对照组和空白组(P<0.01).上述结果表明,干扰PTEN基因能显著抑制Caspase-3的表达,提高p-Akt的表达,揭示低表达PTEN通过调控Akt信号通路抑制牛脂肪细胞凋亡.
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