投稿须知
  1、来稿研究论文要求试验设计合理,统计方法正确,数据准确可信,文字精炼,用词规范,图表清晰,论点明确,有创新性。综述应反映畜牧学科前沿的研究动 ...

猪RUVBL2真核表达载体的构建及其在CHO细胞中的表达

作者:徐桢 陈云 卫恒习 李莉 孟立 张守全

关键词: 猪; RUVBL2基因; 真核表达载体; CHO细胞;

摘要:RUVBL2(RuvB-like 2)蛋白是进化上高度保守AAA+(ATPases Associated With Diverse Cellular Activities,AAA)家族成员之一,CHO(Chinese Hamster Ovary)细胞被广泛地用于表达重组DNA蛋白。为探究猪睾丸组织的RUVBL2基因是否能够在CHO细胞中表达,本实验以猪睾丸组织的cDNA为模板,PCR扩增RUVBL2目的基因,并将其克隆至pIRES2-EGFP(Mammalian Expression Vectors pIRES2-EGFP)载体上,进一步转化到DH5α中,再进行PCR、酶切及测序鉴定;将重组质粒转染到CHO细胞中,再进行荧光、RT-PCR、Western blot检测。结果显示:PCR、酶切及测序都证实了RUVBL2基因正确地插入到了载体质粒pIRES2-EGFP的多克隆位点;荧光、RT-PCR、Western blot也证实了RUVBL2基因在CHO细胞中的成功表达。本实验成功构建了猪的pIRES2-EGFP-RUVBL2真核表达载体,并证实了猪睾丸组织中的RUVBL2基因能够在CHO细胞中表达。


上一篇:丁酸梭菌发酵龙眼多糖的工艺优化及多糖含量变化
下一篇:小尾寒羊MYL1基因启动子区的克隆、分析及蛋白表达

Copyright © 2005 By 中国畜牧兽医学会,All Rights Reserved. 京ICP备11031668号